RRNA depletion with Streptomyces coelicolor A3(2) specific probes

From ActinoBase

Organisms

This protocol has been tested with Streptomyces coelicolor A3(2) MT1110

Description

rRNA depletion using commercial kits targeting generic bacterial sequences is not 100% efficient in the High GC organism S. coelicolor.

Depletion using the NEBNext RNA Depletion Core Reagent Set with RNA Sample Purification Beads (https://www.neb.com/en-gb/products/e7870-nebnext-rna-depletion-core-reagent-set-with-rna-sample-purification-beads#Product%20Information) and custom DNA probes designed for S. coelicolor is more effective than the QIAseq FastSelect 5S/16S/23S kit (Qiagen #335927); NEBNext rRNA Depletion Kit (Bacteria) (NEB #E7850); and Illumina Ribo-zero rRNA Removal Kit (Bacteria) (Illumina #MRZMB12424, discontinued). The Illumina kit tested was subsequently replaced by the Illumina Ribo-Zero Plus rRNA Depletion Kit (Illumina #20040526).

In addition, three abundant non-mRNA RNAs can also be depleted using the custom probes (Table 1).

Table 1. Abundant non-mRNA RNAs in S. coelicolor.

RRNA depletion table 1.png

Materials

Single stranded DNA probes at 2µM concentration in IDTE pH 7.5 (10mM Tris-HCl / 0.1mM EDTA). Integrated DNA Technologies can produce these from their 25nmole DNA oligo pool product. Probes are listed in Table 2 in the Notes section below.

NEBNext RNA Depletion Core Reagent Set with RNA Sample Purification Beads (https://www.neb.com/en-gb/products/e7870-nebnext-rna-depletion-core-reagent-set-with-rna-sample-purification-beads#Product%20Information).

Protocols

As per manufacturer’s instructions.

Notes

The following histograms illustrate effectiveness of rRNA depletion using various methods. Histograms show percentage of bases aligned to NCBI reference sequence NC_003888.3 using Hisat2 program for a number of samples, classified as follows - Coding = RNA aligned to coding sequences; Transcribed not translated = RNA aligned to rRNA, tRNA and sRNA; Intergenic = RNA aligned to 5' or 3' UTRs or between annotated sequences. Each graph is from a separate experiment, and total RNA has been extracted from mycelium using chloroform / phenol before being rRNA depleted, libraries prepared and sequenced.

QIAseq FastSelect 5S/16S/23S kit

PanelA.png

NEBNext rRNA Depletion Kit (Bacteria)

PanelB.png

Illumina Ribo-zero rRNA Removal Kit (Bacteria)

PanelC.png

rRNA depletion with S. coelicolor specific probes

PanelD.png


Table 2 List of probes

Sequence Target
CAAGTCCTTGCGCGACGCTCCCACGGCTTGTAGGCACACGGTTTCAGGTACTATTT rRNA
CAGTCACGACGCAAGGACAAGTCCTTGCGCGACGCTCCCAC rRNA
ACCTCGCAACACACCGCAAACTCGCAGGCTCATTCTTCAAAAGGCACGCAGTCACGACG rRNA
CTACGGCTTCCCCACCCGGGTTAACCTCGCAACACACCGC rRNA
TTAACCCAACATCTCACGACACGAGCTGACGACAGCCATGCACCACCTGTACACCGA rRNA
CGCTCGTTGCGGGACTTAACCCAACATCTCACGACACGAG rRNA
CAACACCCCGAAGGGCTTGCTGGCAACACGGGACAAGGGTTG rRNA
CACCTTCCTCCGAGTTGACCCCGGCGGTCTCCCGTGAGTC rRNA
GACATAAGGGGCATGATGACTTGACGTCGTCCCCACCTTC rRNA
GTATCGCAGCTCATTGTACCGGCCATTGTAGCACGTGTGCAGCCCAAGACATAA rRNA
TTTTGAGATTCGCTCCACCTTGCGGTATCGCAGCTCATTGTAC rRNA
CAGACCCCAATCCGAACTGAGACCGGCTTTTTGAGATTCG rRNA
AATGCTGATCTGCGATTACTAGCGACTCCGACTTCATGGGGTCGAGTTGCAGAC rRNA
GAACGTATTCACCGCAGCAATGCTGATCTGCGATTACTAG rRNA
TACCGACTTTCGTGACGTGACGGGCGGTGTGTACAAGGCCCGGGAACGTATTC rRNA
GCCACCGGCTTCGGGTGTTACCGACTTTCGTGACGTGACG rRNA
TTCGTCCCAATCGCCAGTCCCACCTTCGACAGCTCCCTCCCACAAGGGGTTGGG rRNA
CGCACCTTCCGGTACGGCTACCTTGTTACGACTTCGTCCCAATCGCCAGTCCCA rRNA
TTCGACCCTCGCAGATGCCTGCGAGGGTCAGTATCCGGTATTAGACCCCGTTTCCAG rRNA
GAAAGGAGGTGATCCAGCCGCACCTTCCGGTACGGCTACC rRNA
TTCACCGCCGGAGCTTTCGACCCTCGCAGATGCCTGCGAG rRNA
CATTACCTCACCAACAAGCTGATAGGCCGCGGGCTCATCCTTC rRNA
CTCTCAGGCCGGCTACCCGTCGTCGCCTTGGTGAGCCATTAC rRNA
GTAGGAGTCTGGGCCGTGTCTCAGTCCCAGTGTGGCCGGTCG rRNA
TGCATCAGGCTTTCGCCCATTGTGCAATATTCCCCACTGCTGCCTCCCGTAGGAGTCT rRNA
TGCTGAAAGAGGTTTACAACCCGAAGGCCGTCATCCCTCACGCGGCGTCGCTGCATCA rRNA
TTCTTCTGCAGGTACCGTCACTTTCGCTTCTTCCCTGCTGAAAGAGGTTTACAA rRNA
CTACGTATTACCGCGGCTGCTGGCACGTAGTTAGCCGGCGCTTCTTCTG rRNA
CTCTTTACGCCCAATAATTCCGGACAACGCTTGCGCCCTACGTATTAC rRNA
GGGCTTTCACAACCGACGTGACAAGCCGCCTACGAGCTCT rRNA
CTACCGAACTCTAGCCTGCCCGTATCGACTGCAGACCCGGGGTTAAGCCCCG rRNA
ATATCTGCGCATTTCACCGCTACACCAGGAATTCCGATCTCCCCTACCGAACTCTAG rRNA
CGGTGTTCCTCCTGATATCTGCGCATTTCACCGCTACACC rRNA
ACGCTTTCGCTCCTCAGCGTCAGTATCGGCCCAGAGATCCGCCTTCGCCACCGGTGT rRNA
GACTACCAGGGTATCTAATCCTGTTCGCTCCCCACGCTTTCG rRNA
ACAACGTGGAATGTTGCCCACACCTAGTGCCCACCGTTTACGGCGTGGACTACCA rRNA
CTTAATGCGTTAGCTGCGGCACGGACAACGTGGAATGTTG rRNA
TCAATTCCTTTGAGTTTTAGCCTTGCGGCCGTACTCCCCAGGCGGGGCACTTAA rRNA
ATTAAGCCACATGCTCCGCCGCTTGTGCGGGCCCCCGTCAATTCCTTTGAGTTTTA rRNA
TCAAGCCTTGGTAAGGTTCTTCGCGTTGCGTCGAATTAAGCCACATGCTCCGCCGCTT rRNA
CATCTCTGATGCTTTCCGGTGTATGTCAAGCCTTGGTAAGGTTCTTC rRNA
ACAGCCATGCACCACCTGTACACCGACCACAAGGGGGGCACCATCTCTGATGCTTTCC rRNA
TGTAACCGGGCGTTTCCCCTACGCTATGACCACCGAAACC rRNA
CAGTACCATCGGCGCTGTAAGGCTTAGCTTCCGGGTTCGAAATGTAAC rRNA
GTTCGGCGGCGTCCTACTCTCCCACAGGGTCCCCCCTGCA rRNA
CACTCCCCTCAACTCCGAAGAGATCAGGGCGGCTTCACGG rRNA
CCATCACTCACCTACTAACCGCTTGGTTCGGCGGCTCCAC rRNA
GTCCTTCATCGGTTCCTGGTGCCAAGGCATCCACCGTGCGCCCTTAAAAACTT rRNA
CTTGTAGGCACACGGTTTCAGGTACTATTTCACTCCGCTCCCG rRNA
CACGCAGTCACGAGACACCAAGCAAGCTTGATGTCCGACGCTCCCACGGCTTGTAGGCAC rRNA
TCTTCAAAAGGCACGCAGTCACGAGACACCAAGCAAGCTT rRNA
CACCCGGGTTAACCTCGCAACACACTGCAAACTCGCAGGC rRNA
GCGTGCTACTAAAACGCCCTATTCGGACTCGCTTTCGCTACGGCTTCC rRNA
GATCACTCCGCTTCGGGTCTTGAGCGTGCTACTAAAACGC rRNA
TCGCAGATGCCTGCAAGGGTCAGTATCCGGTATTAGACCCCGTTT rRNA
TCATCCTTCACCGCCGCAGCTTTCGAACCTCGCAGATGCC rRNA
ATGTAACCGGGCGTTTCCCCTACGCTATGACCACCGAAAC rRNA
CGTCCTACTCTCCCACAGGGTCCCCCCTGCAGTACCATCG rRNA
CATCGCCTATCCAGTGCTCTACCTCCGGCAAGAAACACAC rRNA
CATTCGGAGTTTGGCTAAGGTCAGTAACCCGGTAGGGCCCATCG rRNA
CAGTCTCACTGCCGCGCTCTCACTTACCGGCATTCGGAGTTTG rRNA
ATGCTCTGGGCTGTTTCCCTCTCGACCATGGAGCTTATCCCCCACAGTCTCACTG rRNA
CTTAGGGGCCTTAGTCGATGCTCTGGGCTGTTTCCCTCTCG rRNA
GTTGTCTGTGCGACTCCACATCCTTTCCCACTTAGCGTACGCTTAG rRNA
TATTACGCACTCTTTCAAGGGTGGCTGCTTCTAAGCCAACCTCCTGGTTGTCTGT rRNA
GATCAAAGCCTGGTTGACGACTCCCCGGGGCCTATCGTGG rRNA
CGGAATCACTAGACCAGTGAGCTATTACGCACTCTTTCAAGG rRNA
TATTGCTGCAATGACACGACTTCGGCGGTACGCTTGAGCCCCGCTACATTGTCG rRNA
CATCACAGCCGGCGTTGGCCGTATTGCTGCAATGACACGACTTC rRNA
TCCACAACTCGCTTCCGCGGCTGCTTCACCCGGCACACGACGCTCCCCTACCCATCACA rRNA
TACTCATGCCTGCATTCTCACTCGTGAACCGTCCACAACTCGCTTCCGCGGCTGCTT rRNA
CAAACGTTTCTCACGTTTGTATCGCTACTCATGCCTGCATTCTCACTC rRNA
CAGGAACCCTTAGTCAATCGGCGCAAACGTTTCTCACGTTT rRNA
CTTAGGTCCCGACTTACCCTGGGCAGATCAGCTTGACCCAG rRNA
GAATATCAACCGGTTATCCATCGACTACGCCTGTCGGCCTCGCCTTAGGTC rRNA
TTAGCATCACGATGCTCGATGTTTGACGCTTCACAGCGGGTACCGGAATATCAA rRNA
GAAGAGATCAGGGCGGCTTCACGGCCTTAGCATCACGATG rRNA
CATCACTCACCTACTAACCGCTTGGTTCGGCGGCTCCACC rRNA
TGTGTTCAGCAGCGGGTGACAGCCCATGACGACTGCCGGGTTTCCCCATTCGGACACCC rRNA
GACAACCACCGCCCGGGATGGACTACCTTCCTGCGTCACCCCAT rRNA
CAGATGCTCGCGTCCACTGTGCAGTTCTCAAACAACGACC rRNA
TGCGGATTTACCTACACACCGGCCTACACCCTTACCCCGGGACAACCACCG rRNA
CATCAGGTCTCAGCCACAAGGTGTGCGGATTTACCTACAC rRNA
TTTTCTCGACAGCATAGGATCATCCACTTCACCACAATCGGCTCGGCATCAGGTCT rRNA
CCATGAAACTCGCTAGAGGCTTTTCTCGACAGCATAGGATCATC rRNA
TATTCTCTACCTGACCACCTGAGTCGGTTTAGGGTACGGGCCGCCATGAAACT rRNA
GAGTTCCTTAACCATAGTTCACCCGAACGCCTCGGTATTCTCTACCTGAC rRNA
CTTCTCCCGAAGTTACGGGGGCATTTTGCCGAGTTCCTTAACCA rRNA
CACCCCCAGCTCAGAGTGCAAAACTCGTCACCAGGTGTGG rRNA
GTGTTTTTAGTAAACAGTCGCTTCTCGCTGGTCTCTGCGG rRNA
GTTCCCTCCACACTGCCTATGTGTTCAGCAGCGGGTGACAG rRNA
GTATACATCGCCTTACGGCTTCGCACGGACCTGTGTTTTTA rRNA
CTTAACGTTCCAGCACCGGGCAGGCGTCAGTCCGTATACATC rRNA
TAAGTTCTCAGCTTCGCCACACCGAAATGTGACTAACCGGTCCCCTTAACGTT rRNA
TTAGGATGGTTATAGTTACCACCGCCGTTTACTGGCGCTTAAGTTCTCAG rRNA
GTCGGAACTTACCCGACAAGGAATTTCGCTACCTTAGGATGGTTATAGT rRNA
TATGGTTGAGACAGTCGAGAAGTCGTTACGCCATTCGTGCAGGTCGGAACTTACC rRNA
GAAACGAGCATCTTTACTCGTAGTGCAATTTCACCGGGCCTATGGTTGAG rRNA
GGTCTTTCCGTCCTGCTGCGCGAAACGAGCATCTTTACTC rRNA
GAACCGAACACCAATATCAAACTGTAGTAAAGGTCCCGGGGTCTTTC rRNA
CTTCAAAGTCTCCCAGCTATCCTACACAAGCCGAACCGAACACCAATA rRNA
AGACTGGTATTTCAACGACGACTCCACCCACACTGGCGTGCGAGCTTCAAAGTCT rRNA
GTTAGACATCCAGCACGACCAGACTGGTATTTCAACGACGACTC rRNA
TTAAACTACCCATCAGACACTGTCCCTGATCCGGATCACGGACCCAGGTTAGACAT rRNA
GAATCACGGTTGTTTTCTCTTCCTGCGGGTACTGAGATGTTTCACTTC rRNA
GTTACTCTTTAGGAGGCAACCGCCCCAGTTAAACTACCCATCAGACACTG rRNA
ACTCAACACCTGATTGCCAACCAGGCTGAGGGAACCTTTGGGCGCCTCCGTTACT rRNA
GTCTCACAGTCAAGCTCCCTTGTGCACTTACACTCAACACCTGATTG rRNA
GACTTTCGTCCCTGCTCGACCCGTCGGTCTCACAGTCAAG rRNA
TACCTTTTATCCGTTGAGCGACGGCGCTTCCACAAGCCACCGCCGGATCACTAGTC rRNA
GTCGATATGGACTCTTGGGGAAGATCAGCCTGTTATCCCCGGGGTACCTTTTAT rRNA
GACATCGAGGTGCCAAACCATCCCGTCGATATGGACTCTTG rRNA
TTTAATGGGCGAACAGCCCAACCCTTGGGACCGACTCCAGCCCCAGGATGCGACGA rRNA
TCACGACGTTCTAAACCCAGCTCGCGTACCGCTTTAATGGGCGAACAGCCCAACC rRNA
GATAGGGACCGAACTGTCTCACGACGTTCTAAACCCAGCTC rRNA
GTCCTCTCGTACTAGGGACAGCCCTTCTCAAGACTCCTAC rRNA
TCTCACACGTATACGGTTTGGCCTCATCCGGTTTCGCTCGCCACTACTCCCGGAAT rRNA
CATGCCCTTGGCAGGACAACTGGCACACCAGAGGTTCGTC rRNA
CTTAGATGCTTTCAGCGGTTATCCCTCCCGAACGTAGCCAAC rRNA
GTGGGAGTCCTCATCTCGAAGCAGGCTTCCCGCTTAGATG rRNA
CTATCAACCCAGTCGTCTACTGGGAGCCTTAACCCCTCAAGG rRNA
GCCTATTAGTACCGGTCACCTCCACACCTCACGGTGCTTCCAGATCCGGCCTATCAAC rRNA
AGGACAAGCCCTCGGCCTATTAGTACCGGTCACCTCCACA rRNA
CACACGCAACCCCTGCCGGGTCTCACACGTATACGGTTTG rRNA
TTTCTGACTCGTCTCACGGCCGGCAGACCGTAAAAGAGAGATCCCACAACCCCGCACA rRNA
TTTCGCATGTCCTTCGCCTACATCAACGGTTTCTGACTCGTCTCACGGCCGGCAGA rRNA
CTTACCCTCTACGCCGGACCTTTCGCATGTCCTTCGCCTACATC rRNA
GTGTCTCTCAAACGAGCCGTTGACGTTTCGACTACGGGGGTCTTACCCTCTA rRNA
ATCCACCGTGCGCCCTTAAAAACTTGGCCACAGATGCTCG rRNA
GATTTCTCGGGCCCCGTGCTACTTGGGTGTCTCTCAAACGAG rRNA
GAATATTTAGGCTTAGCGGGTGGTCCCGCCAGATTCACACGGGATTTCTC rRNA
CTCACGGTACTATCCGCTATCGGTCACCAGGGAATATTTAGGCTTAG rRNA
GTTTCAGGTACTATTTCACTCCGCTCCCGCGGTACTTTTCACCATTC rRNA
GATGGAGCAAGCTCCATCCCGACGCTCCCACGGCTTGTAGGCACACGGTTTCAGGTACT rRNA
CACGCAGTCACGAGGATGGAGCAAGCTCCATCCCGACGCTC rRNA
CTCGGGTTAACCTCGCAACACACCGCAAACTCGCAGGCTCATTCTTCAAAAGGCACGC rRNA
CTACGGCTTCCCCACTCGGGTTAACCTCGCAACACACCGC rRNA
GTCTTGAGCGTGCTACTAAAAACGCCCTATTCGGACTCGC rRNA
CTCCCACGTCCTTCATCGGTTCCTGGTGCCAAGGCATCCAC rRNA
CTTCAACCTGCCCATGGCTAGATCACTCCGCTTCGGGTCTTGAG rRNA
GGTTCGGTCCTCCACGACCTCTTACAGCCGCTTCAACCTG rRNA
CTAACCACAGGTCATCCCCCAGGTTTTCAACCCTGGTGGGTTCGGTCC rRNA
AGAACCAGCTATCACGGAGTTTGATTGGCCTTTCACCCCTAACCACAGGTCATC rRNA
CAAGAAACACACGACGCTGCACCTAAATGCATTTCGGGGAGAACCAGCTATCA rRNA
TTTTAGCCTTGCGGCCGTACTCCCCAGGCGGGGCACTTAATGCGTTAGCTGCGGCAC rRNA
CCGTCAATTCCTTTGAGTTTTAGCCTTGCGGCCGTACTCC rRNA
AATAATCCGACCGTTCACAGCGTCCTCGCTGTTGTGTTACTTCAAAGGAA rRNA
TTCTTCGCGTTGCGTCGAATTAAGCCACATGCTCCGCCGCTTGTGCGGGCCCCCGTCAA rRNA
GTGTATGTCAAGCCTTGGTAAGGTTCTTCGCGTTGCGTCGAATTAAG rRNA
GGGGGCACCATCTCTGATGCTTTCCGGTGTATGTCAAGCC rRNA
TCACGACACGAGCTGACGACAGCCATGCACCACCTGTACACCGACCACAAGGGGGGCACC rRNA
CTTAACCCAACATCTCACGACACGAGCTGACGACAGCCATG rRNA
CAACACGGGACAAGGGTTGCGCTCGTTGCGGGACTTAACC rRNA
GTCTCCCGTGAGTCCCCAACACCCCGAAGGGCTTGCTGGCAAC rRNA
ACATAAGGGGCATGATGACTTGACGTCGTCCCCACCTTCCTCCGAGTTGACCCCG rRNA
ATTGTACCGGCCATTGTAGCACGTGTGCAGCCCAAGACATAAGGGGCATGATGACTTGA rRNA
TTTTGAGATTCGCTCCACCTTGCGGTATCGCAGCTCATTGTACCGGCCATTGTAGCACGT rRNA
CAATCCGAACTGAGACCGGCTTTTTGAGATTCGCTCCACCTTGCGGTAT rRNA
ATTACTAGCGACTCCGACTTCATGGGGTCGAGTTGCAGACCCCAATCCGAACTGAGA rRNA
TATTCACCGCAGCAATGCTGATCTGCGATTACTAGCGACTCCGACTTCATG rRNA
GTGTACAAGGCCCGGGAACGTATTCACCGCAGCAATGCTG rRNA
GTAATCGGGTGACACCACGAGAGCGGAACAGTCGGAGGAATAA rRNA
GTGTTACCGACTTTCGTGACGTGACGGGCGGTGTGTACAAG rRNA
CACCTTCGACAGCTCCCTCCCACAAGGGGTTGGGCCACCGGCTTCGGGTGTTA rRNA
CTACCTTGTTACGACTTCGTCCCAATCGCCAGTCCCACCTTCGACAG rRNA
TCCTTAGAAAGGAGGTGATCCAGCCGCACCTTCCGGTACGGCTACCTTGTTACGA rRNA
TGCAGTCGGCTATGTGCTCCTTAGAAAGGAGGTGATCCAG rRNA
GATCAAACTCTCCGTGAATGTATACCCGTAATCGGGTGAC rRNA
AAGTGGTTCATCGTTCGACTTGCATGTGTTAAGCACGCCGCCAGCGTTCGTCCTGA rRNA
TATCAACATATCTGGCGTTGACTTTTGGCACGCTGTTGAGTTCTCAAGGAA rRNA
TGTTACTCACCCGTTCGCCACTAATCCCCACCGAAGTGGTTCATCGTTCGACTT rRNA
CTTGTCCCAGAGTGAAGGGCAGATTGCCCACGTGTTACTC rRNA
GCAGATGCCTGCGAGGGTCAGTATCCGGTATTAGACCCCGTTTCCAGGGCTTGTCCCA rRNA
ATCCTTCACCGCCGGAGCTTTCGAACCTCGCAGATGCCTGCGAGGGTCAGTATCC rRNA
GATAGGCCGCGGGCTCATCCTTCACCGCCGGAGCTTTCGA rRNA
GTCGCCTTGGTGAGCCATTACCTCACCAACAAGCTGATAG rRNA
TAGGAGTCTGGGCCGTGTCTCAGTCCCAGTGTGGCCGGTCGCCCTCTCAGGCCGGCTA rRNA
ATTGTGCAATATTCCCCACTGCTGCCTCCCGTAGGAGTCTGGGCCGTGTCTCAGTC rRNA
CGTCGCTGCATCAGGCTTTCGCCCATTGTGCAATATTCCC rRNA
CTTCTTCCCTGCTGAAAGAGGTTTACAACCCGAAGGCCGTCATC rRNA
TTCAAAGGAACCTCAACCCGAACGGAGATCCGATCAGGTCGGGGTATCAACATAT rRNA
GTAGTTAGCCGGCGCTTCTTCTGCAGGTACCGTCACTTTC rRNA
ATAATTCCGGACAACGCTTGCGCCCTACGTATTACCGCGGCTGCTGGCACGTAGTTA rRNA
CTTTCACAACCGACGTGACAAGCCGCCTACGAGCTCTTTACGCCCAATAATT rRNA
TATCGACTGCAGACCCGGGGTTAAGCCCCGGGCTTTCACAACCGACGTGACAAG rRNA
GATCTCCCCTACCGAACTCTAGCCTGCCCGTATCGACTGCAGAC rRNA
CTGATATCTGCGCATTTCACCGCTACACCAGGAATTCCGATCTC rRNA
CAGAGATCCGCCTTCGCCACCGGTGTTCCTCCTGATATCTG rRNA
CACGCTTTCGCTCCTCAGCGTCAGTATCGGCCCAGAGATC rRNA
CACCGTTTACGGCGTGGACTACCAGGGTATCTAATCCTGTTC rRNA
ACTTAATGCGTTAGCTGCGGCACGGACAACGTGGAATGTTGCCCACACCTAGTGCCCA rRNA
GTTCGAAATGTAACCGGGCGTTTCCCCTACGCTATGACCACCGAAA rRNA
CTTAGGATGGTTATAGTTACCACCGCCGTTTACTGGCGCTTAAGTTCTCA rRNA
CCAAGCAAGCTTGATGTCCGACGCTCCCACGGCTTGTAGGCACACGGTTTCAGGTACTA rRNA
CAGTCACGAGACACCAAGCAAGCTTGATGTCCGACGCTCC rRNA
CTTGAGCGTGCTACTAAAAGCGCCCTATTCGGACTCGCTT rRNA
CTACCTTGTTACGACTTCGTCCCAATCGCCAGTCCCACCTTCGACAGCTCCCT rRNA
AAGGAGGTGATCCAGCCGCACCTTCCGGTACGGCTACCTTGTTACGACTTCGTC rRNA
CCAGGATCAAACTCTCCGTGAATGTATACCCGTAATCGGG rRNA
CTACCTTGTTACGACTTCGTCCCAATCGCCAGTCCCACCTTCG rRNA
CTCTCACTTACCGGCATTCGGAGTTTGGCTAAGGTCAGTAAC rRNA
CATTCGGACACCCCCGGATCAAAGCCTGGTTGACGACTCC rRNA
GCTTATCCCCCACAGTCTCACTGCCGCGCTCTCACTTACC rRNA
CTTAGTCGATGCTCTGGGCTGTTTCCCTCTCGACCATGGAGCTTATC rRNA
CACATCCTTTCCCACTTAGCGTACGCTTAGGGGCCTTAGTCGATGCTCTG rRNA
CTTCTAAGCCAACCTCCTGGTTGTCTGTGCGACTCCACATCCTTTC rRNA
AATCACTAGACCAGTGAGCTATTACGCACTCTTTCAAGGGTGGCTGCTTCTAAGC rRNA
CTACATTGTCGGCGCGGAATCACTAGACCAGTGAGCTATTA rRNA
CGTATTGCTGCAATGACACGACTTCGGCGGTACGCTTGAG rRNA
GCTCCCCTACCCATCACAGCCGGCGTTGGCCGTATTGCTG rRNA
TTCTCACTCGTGAACCGTCCACAACTCGCTTCCGCGGCTGCTTCACCCGGCACACGACG rRNA
GTTTGTATCGCTACTCATGCCTGCATTCTCACTCGTGAACCGTCCACAAC rRNA
CTTAGTCAATCGGCGCAAACGTTTCTCACGTTTGTATCGCTACTCATG rRNA
GACTTACCCTGGGCAGATCAGCTTGACCCAGGAACCCTTAGTCAATC rRNA
TCCACACTGCCTATGTGTTCAGCAGCGGGTGACAGCCCATGACGACTGCCGGGTTT rRNA
TTATCCATCGACTACGCCTGTCGGCCTCGCCTTAGGTCCCGACTTACCCTGGGCA rRNA
GTACCGGAATATCAACCGGTTATCCATCGACTACGCCTGTC rRNA
GGCCTTAGCATCACGATGCTCGATGTTTGACGCTTCACAG rRNA
CTACTAACCGCTTGGTTCGGCGGCTCCACCACTCCCCTCAACTCCGAAGAGATCA rRNA
GATGGACTACCTTCCTGCGTCACCCCATCACTCACCTACTAAC rRNA
CCGGCCTACACCCTTACCCCGGGACAACCACCGCCCGGGATGGACTACC rRNA
CAAGGCATCCACCGTGCGCCCTTAAAAACTTGGCCACAGA rRNA
CAAGGTGTGCGGATTTACCTACACACCGGCCTACACCCTTAC rRNA
CCACAATCGGCTCGGCATCAGGTCTCAGCCACAAGGTGTG rRNA
CTAGAGGCTTTTCTCGACAGCATAGGATCATCCACTTCACCACAATC rRNA
TTTAGGGTACGGGCCGCCATGAAACTCGCTAGAGGCTTTTCTC rRNA
CTCGGTATTCTCTACCTGACCACCTGAGTCGGTTTAGGGTAC rRNA
GGCATTTTGCCGAGTTCCTTAACCATAGTTCACCCGAACG rRNA
CAGCTCAGAGTGCAAAACTCGTCACCAGGTGTGGCCCCCCTTCTCCCGAAGTTA rRNA
TTGTTTTCTCTTCCTGCGGGTACTGAGATGTTTCACTTCCCCGCGTTCCCTCCACA rRNA
TGTGTTTTTAGTAAACAGTCGCTTCTCGCTGGTCTCTGCGGCCACCCCCAGCTCAGA rRNA
TATACATCGCCTTACGGCTTCGCACGGACCTGTGTTTTTAGTAAACAGTCGCTTCT rRNA
GCAGGCGTCAGTCCGTATACATCGCCTTACGGCTTCGCAC rRNA
GAAATGTGACTAACCGGTCCCCTTAACGTTCCAGCACCGGGCAGGC rRNA
GTTTACTGGCGCTTAAGTTCTCAGCTTCGCCACACCGAAATGTGACTAAC rRNA
GACAAGGAATTTCGCTACCTTAGGATGGTTATAGTTACCACCGCCGTTTA rRNA
AAGTCGTTACGCCATTCGTGCAGGTCGGAACTTACCCGACAAGGAATTTCGCTA rRNA
CTATGGTTGAGACAGTCGAGAAGTCGTTACGCCATTCGTG rRNA
CTGCGCGAAACGAGCATCTTTACTCGTAGTGCAATTTCAC rRNA
CAATATCAAACTGTAGTAAAGGTCCCGGGGTCTTTCCGTCCTGCTGCGCGAAA rRNA
CAGCTATCCTACACAAGCCGAACCGAACACCAATATCAAACTGTAGTAAA rRNA
CACACTGGCGTGCGAGCTTCAAAGTCTCCCAGCTATCCTACACAAG rRNA
TTAGACATCCAGCACGACCAGACTGGTATTTCAACGACGACTCCACCCACACTGGCGTG rRNA
GTTTCGCTCGCCACTACTCCCGGAATCACGGTTGTTTTCTCTTC rRNA
GATCACGGACCCAGGTTAGACATCCAGCACGACCAGACTG rRNA
CAGTTAAACTACCCATCAGACACTGTCCCTGATCCGGATCAC rRNA
GAACCTTTGGGCGCCTCCGTTACTCTTTAGGAGGCAACCG rRNA
CTTGTGCACTTACACTCAACACCTGATTGCCAACCAGGCTGAGGGAACCTTT rRNA
GACCCGTCGGTCTCACAGTCAAGCTCCCTTGTGCACTTAC rRNA
CTTCCACAAGCCACCGCCGGATCACTAGTCCCGACTTTCGTCCCTG rRNA
GTACCTTTTATCCGTTGAGCGACGGCGCTTCCACAAGCCAC rRNA
CAAACCATCCCGTCGATATGGACTCTTGGGGAAGATCAGCCTGTTATC rRNA
CCAGGATGCGACGAGCCGACATCGAGGTGCCAAACCATCC rRNA
GTCTCACACGTATACGGTTTGGCCTCATCCGGTTTCGCTC rRNA
CTTTAATGGGCGAACAGCCCAACCCTTGGGACCGACTCCAG rRNA
GAACTGTCTCACGACGTTCTAAACCCAGCTCGCGTACCGCTTTAATG rRNA
CTTCTCAAGACTCCTACGCGCACAGCGGATAGGGACCGAAC rRNA
CACACCAGAGGTTCGTCCGTCCCGGTCCTCTCGTACTAGG rRNA
TTAGATGCTTTCAGCGGTTATCCCTCCCGAACGTAGCCAACCAGCCATGCCCTTGGCA rRNA
CTCATCTCGAAGCAGGCTTCCCGCTTAGATGCTTTCAGCGGTTATC rRNA
CAGTCGTCTACTGGGAGCCTTAACCCCTCAAGGGGGTGGGAGTCCTCATCTCGAA rRNA
CTTCCAGATCCGGCCTATCAACCCAGTCGTCTACTGGGAG rRNA
CAGACCGTAAAAGAGAGATCCCACAACCCCGCACACGCAACCCCTGCCGGGTCTCA rRNA
TACATCAACGGTTTCTGACTCGTCTCACGGCCGGCAGACCGTAAAAGAGAGAT rRNA
CTTTCGCATGTCCTTCGCCTACATCAACGGTTTCTGACTC rRNA
ACTACGGGGGTCTTACCCTCTACGCCGGACCTTTCGCATG rRNA
CTACTTGGGTGTCTCTCAAACGAGCCGTTGACGTTTCGACTAC rRNA
GCCAGATTCACACGGGATTTCTCGGGCCCCGTGCTACTTG rRNA
TATCCGCTATCGGTCACCAGGGAATATTTAGGCTTAGCGGGTGGTCCCGCCAGATT rRNA
GTACTTTTCACCATTCCCTCACGGTACTATCCGCTATCGGTCAC rRNA
CTTGTAGGCACACGGTTTCAGGTACTATTTCACTCCGCTCCC rRNA
GGGCCTATCGTGGCCTCCCACGTCCTTCATCGGTTCCTGG rRNA
CACGCAGTCACGAGGATGGAGCAAGCTCCATCCCGACGCTCCCACGGCTTGTAGGCA rRNA
CATTCTTCAAAAGGCACGCAGTCACGAGGATGGAGCAAGC rRNA
TACGGCTTCCCCACTCGGGTTAACCTCGCAACACACCGCAAACTCGCAGGCTCAT rRNA
TCGGACTCGCTTTCGCTACGGCTTCCCCACTCGGGTTAAC rRNA
ATCACTCCGCTTCGGGTCTTGAGCGTGCTACTAAAAACGC rRNA
CTCTTACAGCCGCTTCAACCTGCCCATGGCTAGATCACTC rRNA
GTTTTCAACCCTGGTGGGTTCGGTCCTCCACGACCTCTTAC rRNA
GTTTGATTGGCCTTTCACCCCTAACCACAGGTCATCCCCCAGGTTTTCAACC rRNA
GGAGAACCAGCTATCACGGAGTTTGATTGGCCTTTCACCC rRNA
TATCCAGTGCTCTACCTCCGGCAAGAAACACACGACGCTGCACCTAAATGCATTT rRNA
GAGTTTGGCTAAGGTCAGTAACCCGGTAGGGCCCATCGCCTATCCAGTGCTCTA rRNA
CTGTAAGGCTTAGCTTCCGGGTTCGAAATGTAACCGGGCGTTTCCCCTAC rRNA
GTTCGGCGGCGTCCTACTCTCCCACAGGGTCCCCCCTGCAGTACCATCGGCGCTGTA rRNA
GTATTAGACCCCGTTTCCAGGGCTTGTCCCAGAGTGAAGGGCAGATT rRNA
GAGCTTTCGAACCTCGCAGATGCCTGCGAGGGTCAGTATCCGGTATTAGACCCCGTT rRNA
CATCCTTCACCGCCGGAGCTTTCGAACCTCGCAGATGCCT rRNA
CACCGAAGTGGTTCATCGTTCGACTTGCATGTGTTAAGCAC rRNA
TTCGACTTGCATGTGTTAAGCACGCCGCCAGCGTTCGTCCTGAGCCAGGATCAAACTCT rRNA
CAGATTGCCCACGTGTTACTCACCCGTTCGCCACTAATCC rRNA
GCGGATTTACCTACCTGACGTCCTACACCCTTACCCCGGGACAACCACCGC rRNA
CATCAGGTCTCAGACTCATGTCAGGCGGATTTACCTACCTGAC rRNA
CTATTAGTACCGGTCACCTCCACACCTCACGGTGCTTCCAGATCCGGCCTATCAACC rRNA
GGACAAGCCCTCGGCCTATTAGTACCGGTCACCTCCACAC rRNA
CCGGGTTAACCTCGCAACACACCGCAAACTCGCAGGCTCATTCTTCAAAAGGCACGC rRNA
GGTCTTGAGCGTGCTACTAAAACGCCCTATTCGGACTCGC rRNA
TTCGGCGGCGTCCTACTCTCCCACAGGGTCCCCCCTGCAGTACCATCGGCGCTGTAA rRNA
CCGAAGCCTCCGGCGGTCTGCTTTCTGTGGCACTGTCCCG SCOs01
CTGGGCACTGGTGGTCTCTTACACCACCGTTTCACCCTTAC SCOs01
TTCCTTCTTGACCTTGCTCCGGGTGGGGTTTACCTAGCTGCCCAGGTCGCCCTG SCOs01
CTCGAACGTCCGCGCAGAAGCACCGGGGTGCTTCCTTCTTGACCTTGCTC SCOs01
CTCCAGCGGTCTACCCGCGGACTCGGGCGGGCAGCCCTCGAACGTCCGCGCAGAAG SCOs01
CATCCATCTAGGACCGGCGTTGCCACCGGCCTCCAGCGGTCTAC SCOs01
CTGTGGAGCCCGGACGTTCCTCGGGAAGTCCCGTGAGGGACTC SCOs01
GTTCTGTTCCGACGGGGCCTCGCGGTCCCGTCGGCGACGGCCATCCAT SCOs01
CAGACGAGTCGGGCTGTACGCCGGGTTCTGTTCCGACGGG SCOs01
GTCTGCTTTCTGTGGCACTGTCCCGCGGGTCACCCCGGGTGGCCGTTAGCCATCAC SCOs01
CTTAGTAGGAGGCTCGCTTCGCTACCTGAGATCAGGCAGCGAGGGCGAAGG SCOs02
GAACAGCCCCGGGCTGACACTCCCTTAGTAGGAGGCTCGCTTC SCOs02
GATCAAGGTTTAGTCCCCTAGCTGATGCCAGGATCCGGGTC SCOs02
CAGTCACTGTTTGGTTTCCCTCTTCACCCCGTGACCGGGATCAA SCOs02
GAGATCACGCGGACAAGTCTCCGACGGGCCCAGTCACTGT SCOs02
CTTCCCCTGCTTCGACAGCCGCTGTCGAAACCGATCATCC SCOs02
AATCAGGGCTTCTCCGTGTGCAGTCCGCTTCGATTTTCTCGGCCCCGGAGATCACG SCOs02
GAATCGAACCCGCGTCCAACGGTGCGGAATCAGGGCTTCTC SCOs02
TTTTTCGGCCTGTGGTTTACGAGATCATGGCCGCTTCCTC SCOs02
CTGCTGGGAGGAATCGCGCTTGGTGTTGGCGATTATTTTT SCOs02
CACGCACCCGCCAGAGCCGACCTACCCTTGCTGCCTTCCG SCOs03

Sign off

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